Instrumen Reaksi Untuk Sintesis Fase Padat Peptida

Apa itu peptida?

Polipeptida adalah zat aktif biologis yang terkait dengan berbagai fungsi sel dalam organisme. Struktur molekulnya adalah antara asam amino dan protein. Ini adalah senyawa yang dibentuk oleh berbagai asam amino yang digabungkan oleh ikatan peptida dalam urutan tertentu. Polipeptida adalah istilah umum untuk zat aktif biologis yang melibatkan berbagai fungsi seluler dalam organisme, dan sering digunakan dalam analisis fungsional, penelitian antibodi, terutama pengembangan obat dan bidang lainnya.

Prinsip Dasar Sintesis Fase Padat Peptida

Pertama, gugus hidroksi dari asam amino terminal hidroksi dari rantai peptida yang akan disintesis dihubungkan dengan resin polimer yang tidak larut dalam struktur ikatan kovalen, dan kemudian asam amino yang terikat pada pembawa fase padat digunakan sebagai komponen amino untuk lepaskan gugus pelindung amino dan hubungkan dengan gugus yang sama. Bagian karboksil teraktivasi berlebih bereaksi untuk memperpanjang rantai peptida. Ulangi operasi tersebut (kondensasi→pencucian→deproteksi→netralisasi dan pencucian→putaran kondensasi berikutnya) untuk mencapai panjang rantai peptida yang akan disintesis. Akhirnya, rantai peptida dibelah dari resin dan dimurnikan untuk mendapatkan polipeptida yang diinginkan. Gugus -amino yang dilindungi oleh BOC (tert-butoxycarbonyl) disebut metode sintesis fase padat BOC, dan gugus -amino yang dilindungi dengan FMOC (9-fluorenemethoxycarbonyl) disebut metode sintesis fase padat FMOC.

Proses Sintesis Polipeptida

A: Pemilihan resin dan imobilisasi asam amino

Ada tiga jenis utama pembawa polimer yang digunakan untuk sintesis polipeptida: polistiren ikatan silang, poliamida, dan resin lipid polietilen-glikol. Imobilisasi asam amino terutama dicapai dengan pembentukan ikatan kovalen antara gugus karboksil dari asam amino yang dilindungi dan gugus reaktif dari resin.

B: Perlindungan dan penghilangan gugus amino, gugus karboksil dan rantai samping

Untuk berhasil mensintesis polipeptida dengan urutan asam amino tertentu, perlu untuk melindungi gugus amino dan karboksil yang tidak terlibat dalam pembentukan ikatan amida, dan pada saat yang sama melindungi gugus aktif pada rantai samping asam amino, dan menghapus kelompok pelindung setelah reaksi selesai. Dalam beberapa tahun terakhir, metode sintesis FMOC telah banyak digunakan. Gugus karboksil biasanya dilindungi dengan membentuk gugus ester. Metil dan etil ester adalah metode umum untuk melindungi gugus karboksil dalam sintesis bertahap.

C: Reaksi pembentukan peptida

Reaksi pembentukan peptida dalam fase padat umumnya untuk menempatkan dua asam amino yang dilindungi amino dan yang dilindungi karboksil dalam larutan tanpa membentuk ikatan peptida. Untuk membentuk ikatan amida, metode yang umum digunakan adalah dengan mengaktifkan gugus karboksil menjadi ikatan amida. Ikatan amida dibentuk dengan mencampurkan anhidrida asam, ester aktif, klorida asam atau membentuk anhidrida asam simetris dengan zat kondensasi kuat (seperti karbodiimida).

D: Pembelahan dan pemurnian rantai peptida sintetis

Metode BOC menggunakan TFA+HF untuk membelah dan menghilangkan gugus pelindung rantai samping, dan metode FMOC menggunakan TFA secara langsung. Pemurnian lebih lanjut, pemisahan dan pemurnian rantai peptida sintetik biasanya dilakukan dengan kromatografi cair, kromatografi afinitas, elektroforesis kapiler, dan sejenisnya.

Apa instrumen reaksi untuk sintesis fase padat peptida?

Proses sintesis peptida fase padat sangat rumit dan memerlukan pemantauan intuitif oleh operator. Pada saat yang sama, pemotongan online dapat dilakukan setelah sintesis (reagen pemotongan TFA sangat korosif). Persyaratan ini membatasi bahan reaktor. Reaktor kaca digunakan oleh banyak ahli kimia dan biologi karena sifatnya yang benar-benar transparan dan tahan korosi.

Dengan pengembangan teknologi sintesis fase padat peptida dan peningkatan ketahanan korosi bahan baja tahan karat, reaktor baja tahan karat 316 juga telah digunakan secara bertahap di reaktor laboratorium utama, dan memiliki konduktivitas termal yang lebih baik daripada kaca, sambil menghindari karakteristik kaca yang rapuh. .

Adapun operasi yang sebenarnya, bagaimana memilih antara kaca dan stainless steel tergantung pada tujuan pengujian yang berbeda atau kebutuhan produksi.